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水質檢測儀

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日常水質檢測時紅霉素和青霉素的測定方法

發布時間:2022/4/14 17:28:14 來源:貫奧儀器儀表 作者:便攜式多參數水質分析儀器 閱讀次數:

  抗生素相信對于大家來說一點都不陌生,作為一種消炎藥物,它被廣泛應用于各種病痛的治療當中,但濫用它的危害也是顯而易見的;而且近年來除了歐美國家在地表水當中發現抗生素超標外,我國的一些科研檢測人員在對長江和黃河進行抽樣檢測時也發現了抗生素高含量的現象。而這些抗生素絕大部分是由醫療廢水、生活污水、水產養殖廢水、動物用藥、飼料等,排放進地表水中,而后一部分再經飲用水進入到人體當中。而這也是近年來出臺多項水中抗生素類檢測標準的原因。今天我們就來講一下液相色譜-三重四極桿質譜檢測水中抗生素的方法。

  此方法檢測原理是將采集到的水質樣品經0.22pm濾膜過濾,與乙腈1:1混合后進樣,用液相色譜-三重四級桿質譜儀測定。根據保留時間和特征離子定性,外標法定量。

檢測所用試劑

1.乙腈:色譜純。

2.甲酸:色譜純。

4.50%乙腈溶液:取50mL乙腈,用水稀釋至100mL。

5.0.1%甲酸水溶液:取lmL甲酸,用水稀釋至1000mL。

6.標準品:紅霉素,含量≥97.0%;青霉素,含量≥98.0%。

7.紅霉素標準貯備液,濃度為100ug/mL。準確稱取10.0mg紅霉素標準品,用乙腈溶解并稀釋成濃度為100ug/mL的標準貯備液;也可直接購買有證標準溶液,在-10℃以下冷凍、避光保存;或參照制造商的產品說明保存,使用時應恢復至室溫并搖勻。

8.青霉素標準貯備液,濃度為100ug/mL。準確稱取10.0mg青霉素標準品,用50%乙腈溶液溶解并稀釋成濃度為100ug/mL的標準貯備液;也可直接購買有證標準溶液,在-10℃以下冷凍、避光保存;或參照制造商的產品說明保存,使用時應恢復至室溫并搖勻。

9.紅霉素和青霉素混合標準使用液:濃度為10.0ug/mL。分別取紅霉素和青霉素標準儲備液各1.00mL于10.0mL容量瓶中,用50%乙腈溶液定容,可得到紅霉素和青霉素混合標準使用液。

10.濾膜:一次性針頭式過濾器,0.22um,混合纖維素酯(MCE)材質。

11.一次性聚丙烯針管。

檢測所用儀器

1.液相色譜-三重四級桿質譜儀:配有電噴霧離子源(ESI),具備梯度洗脫和多反應監測功能。

2.分析天平:感量為0.0001g。

3.樣品瓶:100mL磨口或帶聚四氟乙烯內襯墊瓶蓋的棕色玻璃瓶。

4.微量注射器或移液器:10ul、50ul、100ul、500ul、1.0mL。

水樣的采集和制備

  我們可以按照相關規定進行水質樣品的釆集。水樣釆集時應充滿樣品瓶,不留空隙。在4℃以下冷藏、避光保存。2d內完成分析。

水樣的制備

  水樣需充分混勻,取約10mL樣品經0.22um濾膜過濾,棄去至少1mL初濾液后,準確移取500uL過濾后的樣品于棕色進樣瓶中,再加入500uL乙腈,混勻后待測。

空白水樣的制備

  用實驗室一級純水代替水樣,然后按照水樣的制備步驟對空白水樣進行操作。

檢測步驟

液相色譜條件

  色譜柱為C18(100mmX2.1mm,粒徑1.7um),或相當者;流動相為A:乙腈,B:0.1%甲酸水溶液;流速為0.25mL/min;柱溫為30°℃;進樣體積為10uL;流動相梯度洗脫程序可以參考相應圖表。

質譜條件

  離子源為電噴霧離子源(ESI);掃描方式為正離子模式;監測方式為多反應監測(MRM);去溶劑氣、錐孔氣、碰撞氣均為高純氮氣或其他合適氣體;

標準曲線的建立

  移取適量的紅霉素和青霉素混合標準使用液,用50%乙腈溶液稀釋,配制至少5個濃度點的標準系列溶液,標準溶液中紅霉素和青霉素的參考濃度質量濃度分別為0.100ug/L、0.200ug/L、0.500ug/L、1.00ug/L、2.00ug/L、5.00ug/L、10.0ug/L和20.0ug/L,移取1.0mL標準系列溶液于棕色進樣瓶中,待測。按照規定中的儀器條件,由低濃度到高濃度依次對標準系列溶液進行測定。以目標化合物的質量濃度(ug/L)為橫坐標,以其對應的響應值為縱坐標,建立標準曲線。

水樣的測定

  將準備好的水樣按照規定中的儀器條件進行測定。

  定性分析可以在同一色譜/質譜條件下對標準溶液和試樣進行測定,根據標準溶液色譜圖的保留時間與試樣的保留時間、標準溶液各色譜峰的特征離子與試樣各色譜峰的特征離子相對照定性。試樣與標準物質保留時間的相對偏差不大于5%。試樣中目標化合物定性子離子的相對豐度(Ksam)。與濃度接近的標準溶液中對應的定性離子的相對豐度(Kskd)進行比較,相對豐度偏差不超過相關圖表規定的范圍,則可判定樣品中存在對應的目標化合物。

  而水樣中紅霉素、青霉素的質量濃度可以直接按照公式進行計算得出。

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